تولید موش ترانس ژنیک واجد ترانس ژن بتالاکتوگلبولین- کلسی تونین
نویسندگان
چکیده
سابقه و هدف: بیان پروتئین های خارجی در شیر پستانداران یکی از راه کارهایی است که به تدریج کاربرد وسیعی در تولید انبوه فرآورده های دارویی نوترکیب می یابد، به ویژه فرآورده هایی که دست خوش بیش ترین تغییرات پس از ترجمه ای می شوند. هدف از این تحقیق ایجاد موش های ترانس ژنیکی بود که واجد ترانس ژن بیان کننده کلسی تونین هیبرید در غدد شیری موش باشند. مواد و روش ها: در این تحقیق از یک پروموتر اختصاصی شیر به نام بتالاکتوگلبولین گوسفندی (oblg) برای القای بیان کلسی تونین هیبرید نوترکیب در شیر موش استفاده شد. بر این اساس، یک سازه ژنی متشکل از 7/10 کیلوباز از ژن oblg شامل پروموتر و ناحیه پایین دست ژن ساخته شد و توالی کدکننده کلسی تونین در چارچوب ترجمه اگزون پنجم oblg قرار داده شد. سازه ژنی کلون شده پس از تخلیص روی شیب سزیم کلراید، از ناقل خود آزاد شد و به وسیله ژل آگارز تخلیص گردید و با فیلتراسیون و رقیق سازی آماده استفاده شد. آن گاه سازه ژنی مزبور به کمک میکرومانیپولاتور در تخمک های تازه بارور موش تزریق شد و سلول های زنده مانده از این تزریقات، به لوله رحمی موش هایی با آبستنی کاذب بازگردانده شدند. حاصل این انتقال زیگوت های تزریق شده 41 موش بود که ژنوتیپ آن ها با استفاده از pcr، اسلات بلات و ساترن بلات تعیین گردید. یافته ها: نتایج تعیین ژنوتیپ با pcr نشان داد که 9 موش از نظر وجود ترانس ژن مثبت هستند، در حالی که تنها 4 موش بلات مثبت داشتند. 3 موش نر و 3 موش ماده، ترانس ژن را به نسل بعدی، یعنی نسل اول موش های ترانس ژنیک انتقال دادند. موش های نسل اول به بعد نیز ترانس ژن را به صورت پایا و تابع قواعد مندلی به نسل دوم انتقال دادند. نتیجه گیری: با توجه به این که 6 موش از 9 موش مزبور توانستند ترانس ژن را حداقل به یکی از موش های نسل بعدی خویش انتقال دهند، این 6 موش را می توان بانی های (founders) مستقل ترانس ژنیک و سردسته خانواده های ترانس ژنیک مزبور در نظر گرفت.
منابع مشابه
تولید موش ترانس‌ژنیک واجد ترانس‌ژن بتالاکتوگلبولین- کلسی‌تونین
سابقه و هدف: بیان پروتئین‌های خارجی در شیر پستانداران یکی از راه‌کارهایی است که به تدریج کاربرد وسیعی در تولید انبوه فرآورده‌های دارویی نوترکیب می‌یابد، به‌ویژه فرآورده‌هایی که دست‌خوش بیش‌ترین تغییرات پس از ترجمه‌ای می‌شوند. هدف از این تحقیق ایجاد موش‌های ترانس‌ژنیکی بود که واجد ترانس‌ژن بیان‌کننده کلسی‌تونین هیبرید در غدد شیری موش باشند. مواد و روش‌ها: در این تحقیق از یک پروموتر اختصاصی شی...
متن کاملپپتید وابسته به ژن کلسی تونین و اعمال آن
Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) was first reported in 1982. This peptide contains 37 amino acids which could be found in Alpha and Beta forms. CGRP shows diversity both in its receptors and biological effects and up to now four different types of receptors have been reported. It can act like a neurotransmitter, local hormone and neuromodulator. They have a variety of effects on different...
متن کاملتولید گیاهان ترانس ژنیک نارنج (citrus aurantium l.) حامل ژن پوشش پروتئینی ویروس تریستزای مرکبات (ctv)
استفاده از اگروباکتریوم تومه فاشینس جهت انتقال ژن به مرکبات از روش های رایج و معمول است. ترانسفورماسیون قطعات از طریق اگروباکتریومی انجام می شود که درستی اتصال ژن به پلاسمید pfgc5941 و صحت انتقال ژن که به روش شوک حرارتی یا الکتروپوریشن به اگروباکتریوم سویه eha105 به وسیله ی pcr بررسی شد. باکتری ها در محیـط کشت حاوی آنتی بیوتیک در طـول 3 شب کشت داده می شوند. سپس از طـریق همکشت کردن، عمل ترانسفور...
15 صفحه اولبررسی تولید وآنالیز گیاه ترانس ژنیک برنج (oryza sativa) حامل ژن تغییر یافته epsps
ترانسفورماسیون ژنتیکی غلات یک ابزار ضروری و قدرتمند برای انتقال ژن می باشد. تکنیک ترانسفورماسیون با اگروباکتریوم یک رویکرد مطلوب برای انتقال ژن محسوب می شود. در این پژوهش گیاهان برنج به روش in planta ترانسفورم شدند. بر این اساس جنین نابالغ برنج با سوزن آغشته به محلول آگروباکتریوم تلقیح شد. آزمایش با دو سویه ی اگروباکتریوم (eha105 و lba4404) حاوی پلاسمیدpcambial105.1r ، سه سطح استوسیرینگون (m? 2...
15 صفحه اولتاثیر فعالیت بدنی بر محتوای پپتید وابسته به ژن کلسی تونین در عصب ترژمینال موش های صحرایی
Background and purpose: The Calcitonin Gene-Related Peptide (CGRP) is a potent dilator of cerebral vessels and that now thought to play a central role in the underlying pathophysiology of migraine. The purpose of present study, therefore, was to investigate effects of endurance, resistance, and strength training on CGRP content in Wistar rat’ trigeminal nerve. Materials and methods: A number o...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
کومشجلد ۶، شماره ۳، صفحات ۲۰۷-۲۱۶
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023